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一、包涵体的纯化和复性概述 包涵体折叠复性的方法应具备以下几个特点：较高的活性蛋白质回收率；复性产物易于与错误折叠蛋白质分离；折叠复性后能够得到较高浓度的蛋白；折叠复性方法易于放大等。蛋白复性的过程通...

一、背景介绍转座子(transposon)是一类可以自主位移并插入宿主基因组中随机位点的移动遗传因子，这种转位特性使它可以直接或间接地造成基因重排，引起基因变异。随着许多微生物基因组全序列的获得，人们...

以下主要介绍真核细胞培养时可能遇到的问题，包括可能的原因及对应的解决方案，希望能为大家科研之路提供些许帮助。 1. 细胞培养不贴壁 可能原因： 1）胰蛋白酶消化过度； 2）支原体污染； 3）培养液中无...

密码子优化是基因表达优化的关键步骤之一。其中涉及mRNA二级结构、稀有密码子、核糖体结合位点等关键因素。简单说，基因能否顺利表达蛋白与稀有密码子含量、mRNA结构是否阻碍翻译有很大关系。基因表达优化还...

稳定转染的是将外源基因整合到细胞自身的基因组上，使外源基因成为细胞基因组的一部分而得以复制。对细胞进行稳定转染最终可筛选得到稳定细胞株，稳定细胞株在重组蛋白/抗体生产、基因编辑、功能研究等方面起着重要...

对哺乳动物细胞转染表达蛋白来说，选择合适的转染方法和转染试剂对转染的成功率起到决定性作用。以下主要列举了瞬时转染和稳定转染的一些方法、原理及适用性，并列举脂质体细胞转染的步骤、注意事项。细胞转染，是指...

一、包涵体复性注意事项1.1最适pH值范围为8.0-9.0之间；1.2温度适宜选择4℃；1.3复性时间一般为24-36小时；1.4低分子化合物 如L-Arg有助于增加复性中间产物的溶解度；脲、盐酸胍、...

一、如何知道未知蛋白它有什么特性及其结构？首先，需要确定一件事，那就是这几个蛋白质有人研究过没有？还是最新发现的蛋白质？如果没有人研究过，那就得用先测部分氨基酸，然后设计引物克隆了。如果有人研究过，那...

一、目的：建立实验室动物建模的标准操作规程。二、适用范围：本SOP适应于科沿有道实验室动物实验所有工作人员。三、主体内容：1.实验动物：选取Balb/c小鼠，SPF级别，出生28-35天，雌性。2.实...