一、HE染色——实验介绍:
苏木精—伊红染色法( hematoxylin-eosin staining ),简称HE染色法,石蜡切片技术里常用的染色法之一。苏木精染液为碱性,主要使细胞核内的染色质与胞质内的核酸着紫蓝色;伊红为酸性染料,主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色 。HE染色法是组织学、胚胎学、病理学教学与科研中最基本、使用最广泛的技术方法。
二、免疫组化——实验原理:
免疫组化(IHC),是应用抗原与抗体特异性结合的原理,通过酶标抗体与底物反应显色,从而对组织细胞内抗原进行定位、定性及定量的研究,称为免疫组织化学技术。免疫组化(IHC)具有特异性强、敏感度高、定位准确的优点。
目前科沿有道主要可以对石蜡切片、冰冻切片、细胞爬片、组织芯片进行免疫组化检测。
三、免疫荧光——实验原理:
免疫荧光(IF),是应用抗原与抗体特异性结合的原理,通过荧光标记抗体对组织细胞内抗原进行定位、定性及定量的研究。目前科沿有道主要可以对石蜡切片、冰冻切片、细胞爬片、组织芯片进行免疫荧光检测。科沿有道目前已突破传统的免疫荧光双标限制,开发出多色免疫荧光技术(最多可达7色)。
四、特殊染色——实验原理:
病理组织切片染色技术作为病理实验室基本方法之一,具有较高的使用价值,也是目前临床外科病理最基本、最常见的形态学检验技术。组织切片染色就是利用染料在组织切片上给予不同颜色,使其与组织或者细胞内的某种成分发生作用,经过透明后通过光谱吸收和折射,使其各种微细结构能显现不同颜色,这样在显微镜下就可显示出组织细胞的各种成分。最常见的组织染色是HE染色,另外科沿有道还可开展其他特殊染色项目,如masson染色、PAS染色、AB-PAS染色、EVG染色、VG染色、维多利亚蓝染色、番红-固绿染色、甲苯胺蓝染色、油红O染色、阿利新蓝染色、碱性磷酸酶染色、瑞氏姬姆萨染色、普鲁士蓝染色、TTC染色及髓鞘染色等。
五、原位杂交检测——实验原理:
原位杂交技术(in situ hybridization)是以标记的核酸分子为探针,在组织细胞原位检测特异核酸分子的技术。使含有特异序列、经过标记的核酸单链即探针,在适宜条件下与组织细胞中的互补核酸单链即靶核酸发生杂交,再以放射自显影或免疫细胞化学方法对标记探针进行探测,从而在细胞原位显示特异的DNA或RNA分子。可检测mRNA、microRNA、LncRNA、DNA,也可应用于各种种属来源的标本,包括哺乳动物、植物标本等,也可应用于组织芯片。
六、原位末端凋亡检测(Tunel)——实验原理:
TUNEL技术可对组织或细胞中凋亡小体或单个凋亡细胞进行染色,能准确反映细胞凋亡最典型的生物化学和形态特征。凋亡细胞内内源性核酸内切酶被激活而将自身染色体DNA切断成缺口或3-OH末端片段这一特点,利用脱氧核苷酸末端转移酶将标有标记物(如地高辛,生物素或荧光素)的脱氧核苷酸转移到3-OH末端,再用免疫组化法或免疫荧光检测凋亡细胞。
七、实验流程:
包埋→切片→染色→白光/荧光拍照→结果分析

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