扫描电镜

病理染色实验——扫描电镜

实验介绍

扫描电镜(SEM)利用样品表面材料的物质性能进行微观成像，可得到有关物质微观形貌的信息，具有较高的放大倍数，成像富有立体感，可以清楚的观察到各种样本凹凸不平表面的细微结构或者内部某个截面的微观形貌特征。扫描电镜的主要原理是利用电子和物质的相互作用从而获取样本微观形貌的信息，目前广泛用于植物学、动物学、细胞生物学、微生物学、医学、材料科学、冶金等诸多学科中物体组织表面或断面精细结构的研究。常用于观察细胞表面、植物木质部、叶面、动物毛纤维、虫类、生物医学材料、晶体材料、细菌、真菌等。不含水的样本可以不用固定。

实验步骤——负染电镜制样步骤：（其中一种）

（1）铜网经过10-30 s的等离子清洗，碳面朝上；

（2）将一块封口膜铺在冰盒上冷却；

（3）将铜网放在冰的封口膜上；

（4）封口膜上分别滴样品、超纯水、PTA染液各20微升；

（5）放置1-2分钟，将铜网、样品、超纯水、PTA冷却；

（6）将铜网碳面扣在样品液滴上吸附样品1分钟，用滤纸与铜网垂直接触吸掉多余液体，直至看不到残留液体，持续吸水10 s；

（7）将铜网碳面扣在超纯水液滴上，并立即捏起铜网用滤纸吸干；

（8）将铜网碳面扣在PTA液滴上染色0.5-1分钟，用滤纸吸干；

（9）放置在滤纸上，在阴凉处自然干燥，即可电镜观察，平时保存也在阴凉处。

实验案例