一、目的:
建立实验室动物建模的标准操作规程。
二、适用范围:
本SOP适应于本公司实验室动物实验所有工作人员。
三、主体内容:
1.实验动物:取适应性饲养一周的健康Balb/c小鼠(具体选择根据要求确定),雌雄均可。
2.实验所需器械及试剂:
1)1mL注射器;
2) 振荡器;
3)超声雾化器;
4)卵清蛋白(OVA);
5)氢氧化铝凝胶(或弗氏佐剂CFA)。
3.致敏剂配制:以每只小鼠20ugOVA加氢氧化铝凝胶至300uL的剂量(或20ug OVA、75uL CFA加PBS至300uL)配制混合液,振荡器上振荡两分钟,形成混悬液。
4.致敏:用注射器分别于小鼠腹部皮下、左右背部皮下各注射100uL新配置的混悬液(每只共300uL),注射时间为第1、8、15天。
5.激发:于第22天开始,以5% OVA溶液用超声雾化器雾化使小鼠吸入,每次30分钟,连续激发7天。
6. 评价:造模成功的小鼠外观及行为学表现为:小鼠腹腔致敏后出现体重下降,经抗原激发出现烦躁不安、擦鼻、打喷嚏、呼吸困难或呼吸节律不整、腹肌抽搐、口唇紫绀伴腹式呼吸、毛发竖起、反应迟钝等症状。

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