近年来随着这生物技术的不断迭代更新,在科学研究中需要提供满足各种实验的样本进行研究,其中肝脏单细胞制备具有至关重要的意义。肝脏是人体重要的代谢和解毒器官,而小鼠作为常用的实验动物,其肝脏单细胞制备为研究肝脏的生理、病理过程提供了基础。通过制备高质量的单细胞悬液,可以深入了解肝脏细胞的组成、功能以及在疾病发生发展中的变化。例如,在单细胞转录组测序中,高质量的单细胞悬液能够准确反映细胞的基因表达情况,为揭示肝脏疾病的发病机制提供有力支持。
小鼠肝脏组织样品前处理悬液制备的实验步骤:
1.准备工作:单细胞制备仪器运行正常,提前配制好组织消化液及终止液
2.样品准备:小鼠安乐死后,在无菌(如需要)条件下解剖并取出肝脏组织,迅速用生理盐水清洗(如不能当天制备可将肝脏切成1-2cm小块放入组织保护液中,4℃保存或运输)。
3.干细胞制备步骤:取适量肝脏组织,用眼科剪将肝脏组织剪碎成小于1cm的块状,导入样品管后,加入组织消化液盖好盖子;放置于仪器管架中按照程序进行消化。
4.仪器程序运行结束后,取出样品管观察组织块,观察到组织块已经几乎全部消化成浑浊的细胞悬液,向管中加入终止液终止消化,离心去除上清后,用稀释液重悬细胞,再用50uM滤网过滤细胞,然后进行离心,取出离心后的样品管,然后弃上清即为我们所需的单细胞,加入PBS用于后续检测。
5.实验结果:样品组织块消化效果完好,细胞量充足,符合客户需要。

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