长链非编码RNA(lncRNA)是一类转录本长度超过200nt的RNA分子,它们并不编码蛋白,而是以RNA的形式在多种层面上(表观遗传调控、转录调控以及转录后调控等)调控基因的表达水平。
目前数据库中许多长链非编码RNA存在非全长或两端数据不准确的情况,无法开展下游相关实验。科沿有道在长链非编码RNA(lncRNA)全长克隆方面积累了丰富的实战经验,保证克隆序列的完整性,为下游实验提供准确可靠的实验数据。
采用invitorgen 公司FirstChoice® RLM-RACE Kit试剂盒,通过5’ RLM-RACE实验,来完成microRNA与靶基因之间切割关系的验证,准确找到切割位点,是研究microRNA相关科研项目的必要实验科目。
本实验采用RACE试剂盒,保证待克隆基因的完整性和准确性,普通基因序列RACE克隆只需15-20个工作日。
1) 提取Total RNA的材料要新鲜,需采样后立即放入液氮中速冻或加入样品稳定剂。
2) Total RNA无降解,OD260/280=1.8 ~ 2.0。
3) 提供尽量多的实验材料:3′ RACE Total RNA>15 μg;5′RACE Total RNA>25 μg。如果基因的含量较低或者未知序列较长,样品量需相应增加。
4) 当验证表明样品中基因含量低时,双方沟通决定下一步实验使用的方法。
5)由于mRNA存在个体和组织差异或基因的序列特殊,RACE的PCR产物测序有时会有个别碱基是套峰或测不通的情况,对未测通部分可继续进行克隆测序,最终提供两个质粒的测序结果,碱基的准确性由客户自行判断。
北京科沿有道生物科技有限公司,专注于生命科学最前沿科研技术服务,具有较好的生物学和医学技术服务平台,能够提供细胞实验、动物模型、病理检测、分子实验、免疫检测、病毒包装、组学服务、基因编辑等整体课题一站式服务。
科沿有道秉承“客户为先,服务至上”的经营理念,以一切为了客户的利益为宗旨,努力为广大客户提供最优质、高效的服务,科沿有道人用实实在在的优质实验技术换取客户的信任,相信在未来的工作中,科沿有道人一定能够成为您的得力助手和值得信赖的合作伙伴。
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