常见实验项目样本收集、保存、运输要求

一、分子生物学平台

1. 荧光定量PCR样本收集运输

A. 细胞:

a.贴壁细胞

以6孔板培养的细胞为例,吸掉培养基,用PBS洗一次,吸掉PBS,加1ml Trizol,将底部细胞吹打起来,转入1.5mlEP管,裂解细胞。-80度冻存,干冰运输。

b.悬浮细胞

将培养基及细胞转入1.5 mLEP管,5000转3 min离心,离心完吸掉上清,加1 mL Trizol,吹打混匀,裂解细胞。-80度冻存,干冰运输。

c.贴壁细胞和悬浮细胞混合

将底部细胞吹打起来,转入1.5 mL EP管,5000转3 min离心,离心完吸掉上清,加1 mL Trizol,吹打混匀,裂解细胞。-80度冻存,干冰运输。

B. 组织:

客户提供的组织,质量请勿低于100 mg,约黄豆粒大小,可直接-80度冻存,干冰运输,也可加入1 mL Trizol后,再行-80度冻存,干冰运输

C. 骨类:

液氮条件下粉碎,之后再加入1 mL Trizol研磨,-80度冻存,干冰运输

D. 其他形式样本:

a.血清、血浆、尿液样本

请提供至少1 mL样本;请在采集样本时立即加入专用trizol,使用比例为样本体积:Trizol体积=1:3。-80度冻存,干冰运输。液体样本不建议直接冻存,请一定在采集样本时加入专用trizol再行冻存寄送。

b.全血

新鲜抗凝全血,按照1:3加入1×红细胞裂解液,裂解10 min,12000 转3 min离心,倒掉废液,留存管底外周血单个核细胞沉淀,加1 mL Trizol,吹打混匀,-80度冻存,干冰运输。

常见实验项目样本收集、保存、运输要求

2. ELISA/生化检测样本收集运输

(1)组织样品:黄豆粒大小组织样本,冻存,低温(液氮或干冰)运输。

(2)血清(24小时内处理):全血样品于室温放置2h或4℃静置过夜,1000 r/min离心20 min,取上清待测。

(3)血浆(24小时内处理):用抗凝管收集血样或往血样品中加抗凝剂,1000 r/min离心15 min,取上清待测。

(4)细胞培养上清:取细胞培养上清1000 r/min离心20 min,取上清待测。

(5)其他液体样品(如尿液,透析液等):1000 r/min离心20 min,取上清待测。

注意:

a.样品处理后的上清可-20℃保存1个月-80℃保存6个月;

b.如果取得上清比较浑浊,可稍微提高转速将上清再次离心。

二、Western Blot平台

1.样本种类

细胞 、动物组织(心、肝、脾、肺、肾、胰、角膜、血管、脊髓、脑)、植物组织(花、叶子)等

2.样本收集

(1)组织样本:需提供的组织,质量请勿低于100 mg,约黄豆粒大小,可-20度冻存,干冰运输。

(2)细胞样本:

a.贴壁细胞,数量不低于1*10^6个,将细胞用胰酶消化下来转入EP管,5000 rpm离心3 min,去上清,加入1 mLPBS重悬后转入新的1.5 mL EP管中,5000 rpm离心3 min,去上清后,PBS再次洗涤一次,留取细胞沉淀,-20℃保存,干冰运输

b.悬浮细胞,数量不低于1*106个,将培养基及细胞转入EP管,5000 rpm离心3 min,去上清,加入1 mL PBS重悬后转入新的1.5 mL EP管中,5000 rpm离心3 min,去上清后,PBS再次洗涤一次,留取细胞沉淀,-20℃保存,干冰运输

(3)蛋白样本:需提取好的蛋白样本,蛋白浓度应不低于2 μg/μl,-20℃保存,干冰运输。

 

三、 细胞平台

1.活细胞

加满培养基;用不透气培养瓶;常温或4℃运输;培养瓶外用自封袋给予包装;细胞量在60-80%为宜;快递最好能在2天内到货;

2.冻存细胞

干冰运输,最好提供2管冻存细胞。

注意:

a.凡是需要我公司进行培养的细胞都要求无菌;

b.直接实验的细胞必须保证细胞量;

c. 流式检测的细胞须告知是否携带有荧光标记。

 

四、病理学平台

1. 常规病理样本

(1)固定样本:

a. 取材后立即固定,固定时间超过半年的样本做免疫组化或免疫荧光效果可能不好

b. 固定液体积至少为组织5倍以上,灌注固定的组织除外;

c. 组织的最终包埋切面需要说明清楚;

d. 固定好的组织只能放在常温或4度冰箱保存,绝对不能放在-20度冰箱保存

e. 如果组织样本处理不符合处理标准(如有的组织外观破烂不完整,包埋切片后达不到客户要求),则不能接收。

(2)蜡块:

取样时核对清楚蜡块数量,常温运输;

(3)石蜡切片:

a. 石蜡切片的保存与运输条件为常温或4度。

b. 玻片应用专用的盒子装好,并固定,避免运输过程中切片碎掉;

2. 透射电镜样本

(1)组织样本:

取材时应尽可能小,一般要求米粒大小,取材后立即用2.5%戊二醛或电镜专用固定液固定,4℃保存,不可常温或冰冻保存,运输过程中应加入冰袋,且避免样本与冰袋直接接触;

(2)细胞样本:

细胞量要求1*10^6个,细胞消化离心后转移至1.5 mLEP管,PBS洗3遍后弃去PBS,向细胞沉淀中加入1 mL 2.5%戊二醛或电镜专用固定液,然后轻轻将细胞沉淀吹散,4℃保存,不可常温或冰冻保存,运输过程中应加入冰袋,且避免样本与冰袋直接接触;

3. 抗体

(1)一抗的运输条件为4度冰盒运输;

(2)二抗及二抗试剂盒的运输条件为4度冰盒运输;

(3)若提供的一抗种属来源不是大鼠、小鼠、兔、山羊,则需要另提供对应的二抗。

北京科沿有道生物科技有限公司,专注于生命科学最前沿科研技术服务,具有较好的生物学和医学技术服务平台,能够提供实验课题设计、论文编辑润色,以及细胞实验、动物模型、病理检测、分子实验、免疫检测、病毒包装、组学服务、基因编辑等整体课题一站式服务。
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hjg
  • 本文由 hjg 发表于 2025年3月10日 10:37:14
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匿名

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