抑菌实验通常被用于检测各类药物、抗菌肽、抗菌材料等的抑菌效果检测,其应用遍布医学、食品、工业、农业等各个领域。科沿有道生物以严谨的实验设计和操作,运用进口全自动影像分析菌落计数仪进行数据分析,为客户提供客观严谨的抑菌实验结果。
最低抑菌浓度(MIC)是指药物能抑制微生物生长的最低浓度,最低杀菌浓度(MBC)是指药物能杀死微生物的最低浓度。MIC和MBC都可用来评价药物抑菌或者杀菌作用的强弱,数值越小,药物的作用越强。一般采用液体培养基稀释法测定药物MIC和MBC。在一系列试管或者96孔板中,用液体培养基对药物进行稀释,使各管或者孔内的药物呈一系列递减的浓度,然后在每支管或者孔内加入一定量的试验菌。培养24~48h后,分光光度计测定各管或者各孔OD600数值,OD值与未加菌液的阴性对照孔接近的最低药物浓度即为MIC。进一步将未长菌管内的培养液移种到新鲜的琼脂培养基平板上,菌落数量少于10Cfu的最小浓度即为MBC。

滤纸折叠为后用打孔器制成直径6 mm的圆形滤纸片,高温灭菌后干燥备用。灭菌后培养基制成不含菌的平板,待平板凝固后吸取200 μL实验菌液均匀涂布于培养基表面。将准备好的滤纸片置于平板中央,吸取药物溶液100 μL,缓慢滴加于滤纸片上,以生理盐水作为对照。37 ℃培养24 h后计算抑菌圈大小。滤纸片扩散法常用于新药的初步筛选试验,用来初步判断药物是否具有抗菌作用。
先制备含菌平板,然后在平板上放置牛津杯,在杯内加入药液,培养后观察周围细菌的生长情况,根据牛津杯抑菌圈的大小来判断药物对该菌的抑菌能力。此法适用于多种药物对一种或几种细菌抗菌能力的初步检测。
1)2021版CLSI抗微生物药物敏感性试验执行标准CLSI 文件M100-S30;
3)中华人民共和国卫生行业标准WS/T639-2018。

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