(一)目的:
建立实验室动物建模的标准操作规程。
(二)主体内容:
大鼠颈动脉损伤模型是研究血管损伤后内膜新生的最佳模型。
品系:SD大鼠;
性别:雄性;
周龄:6-8周;
体重:280-320g。
1)动物适应性饲养7天;
2)术前禁食水12h;
3)以麻醉机麻醉大鼠后,尾静脉注射肝素100U/kg。
4)取颈部正中切口,切口长3-3.5cm。在左侧气管旁寻找到左颈总动脉,用弯血管钳轻轻沿肌丝方向分开该肌肉约3mm,用玻璃血管分离棒钝性分离血管,将左颈总动脉远段与伴行的迷走和交感神经完全分离,同时将血管鞘钝性分离,血管分离出1cm左右。在左胸锁乳突肌乳突端寻找左颈外、颈内动脉分叉处。靠近分叉处用血管分离棒轻轻分离颈外动脉。待分离光滑后。近段、远段下方各穿4号丝线备用。双结结扎颈外动脉远段,留线备插入球囊时提拉用。此时用血管夹夹住颈总动脉近心端以及颈内动脉暂时阻断血流。用显微剪在颈外动脉两根丝线中间横向剪开一小口,自此逆行将0.014 mm PTCA导丝插至膈肌水平,2.0mmx20 mm Ptca导管沿导丝从切口插入至颈总动脉约2~2.5cm,以生理盐水充盈球囊,缓慢来回抽动3次剥脱内膜。结扎颈外动脉近段(距离分叉处至少2mm),松开血管夹查看颈总动脉和颈内动脉是否良好搏动。逐层缝合皮下组织与皮肤。
5)术后肌肉注射青霉素20万U/dx3d预防感染。喂食普通饲料,自由饮水。
2-4周后取血管进行HE染色
光镜下,正常大鼠颈动脉内膜仅内衬单层内皮细胞。中膜一般由3-5层环行排列的弹性膜和平滑肌细胞组成, 排列整齐。外膜由结缔组织组成。内弹力板呈波浪状,有弹性。损伤后新生内膜形成并增厚,管腔呈向心或偏心性狭窄,可见较多的细胞增殖,排列紊乱。
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