细胞侵袭

实验介绍：

Transwell侵袭实验是用一层聚碳酸酯膜将高营养的培养液和低营养的培养液隔开，细胞接种到低营养的培养液里，通常膜孔都被Matrigel覆盖，模仿细胞外基质，肿瘤细胞必须分泌水解酶并通过变形运动才能穿过铺有Matrigel的滤膜，计数进入下室的细胞量可反应肿瘤细胞的侵袭能力。

实验应用：

（1）研究各种细胞因子对恶性肿瘤细胞侵袭和转移的影响；

（2）一些抑制血管生成的新药研究；

（3）研究肿瘤细胞侵袭和转移机制。

实验步骤：

（1）处理好的细胞中加入PBS清洗残余血清，调整浓度至2.5×10⁵cell/ml；

（2）在24孔板中加入 10% FBS DMEM培养基（含双抗），并放入transwell小室，在transwell小室上室底部中央垂直加入100μl终浓度为1mg/ml的Matrigel，37℃温育4－5h使其干成胶状，待Matrigel干成胶状后在transwell上室分别接入200μl各组细胞悬液，37℃，5% CO₂培养箱培养24h；

（3）取出transwell，用PBS小心清洗小室后用70％冰乙醇溶液固定细胞1h，用0.5％结晶紫染液染色，室温中放置20min，PBS清洗一下，用干净的棉球将上室一侧的未迁移的细胞擦干净，显微镜下观察拍照；

案例图片：