细胞划痕实验实验介绍:
细胞划痕实验(Cell scratch assay)是通过在细胞单层上划痕并通过延时显微镜定期捕获图像,从而研究细胞迁移运动、修复能力和细胞间相互作用的实验室技术,基本原理是:在融合的单层细胞上人为制造一个空白区域,称为“划痕/伤口”,划痕边缘的细胞会逐渐进入空白区域使“划痕/伤口”愈合,于细胞迁移过程中在开始和定期捕获图像,通过测量不同时间点的划痕间距并计算差值,可对细胞的迁移能力做出判断
实验应用:
(1)探究细胞迁移运动
(2)探究细胞修复能力
(3)探究细胞间相互作用
实验步骤:
(1)处理好的细胞,调整细胞密度为1×106cell/ml,接种于六孔板,每孔1ml,37℃、5%CO2饱和湿度条件培养过夜;
(2)待细胞密度达到90%左右,铺满6孔板底部,用枪头比着直尺划痕,枪头要垂直,不要倾斜;
(3)用PBS洗细胞3次,去除划下的细胞,加入无血清培养基,同时拍取0h照片;
(4)放入37度5%CO2培养箱,培养,24小时拍照;
案例图片:
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