克隆形成实验

实验介绍：

克隆形成实验是测定单个细胞增殖能力的有效方法。所谓克隆是指单个细胞在体外持续增殖6代以上其后所形成的细胞群，形成肉眼可见的克隆。通过计数得出克隆形成率，可对受检细胞的增殖潜力作定量分析。

实验应用：

常用于抗肿瘤药物敏感性测定、基因治疗、肿瘤放射生物学等方面的研究。

实验步骤：

（1）取处理好的细胞，将细胞悬液稀释，以300个细胞密度接种于6孔板中，均匀分布；

（2）培养皿置于37℃ 5%的CO₂培养箱内，培养10天。

（3）当出现克隆时，弃上清，用PBS浸洗2次，冰乙醇固定15min，结晶紫染色10-30min；

（4）用PBS清洗，计数，克隆形成率=克隆数/接种细胞数*100%。

案例图片：