(一)目的:
建立实验室动物建模的标准操作规程。
(二)主体内容:
骨性膝关节炎(Osteoarthritis,OA)是膝关节的局部损伤及炎症和慢性劳损引起关节面软骨变性,软骨下骨板反应性骨损,导致膝关节出现一系列症状和体征。目前骨性关节炎的动物造模方法有多种,目的是最大程度地模仿人类OA的病理生理过程。进行大鼠膝关节前交叉韧带切断术可以建立大鼠膝关节不稳定骨性关节炎(OA)动物模型。
品系:Wistar大鼠;
性别:雄性;
周龄:6-8周;
体重:180-220g。
1)动物适应性饲养7天;
2)大鼠麻醉后仰卧位固定,剃去右后肢膝关节周边1 cm 区域的毛发,碘消毒后再以体积分数75%的乙醇脱碘。在膝关节内侧做一个纵向约3cm的切口,沿髌骨韧带向上轻开一个小口,剪开肌肉,屈膝,将髌骨外翻。暴露交叉韧带后,剪断前交叉韧带,然后进行抽屉实验,确认前交叉韧带是否完全断离,逐层缝合伤口。
(以小鼠图为例)
1)行为学测定:旷场实验测定运动距离、时间;
2)膝关节病理学观察: 造模后第28 天,各组大鼠处死后用骨科剪剪下右后膝关节,多聚甲醛固定,不同浓度梯度乙醇脱水,石蜡包埋、切片、进行HE 染色,光学显微镜观察组织病理变化,并进行病理评分,膝关节软骨采用mankin 评分标准对滑膜分级评分。
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