茜素红染色简介

一、技术简介：

茜素红S(Alizarin Red S)钙染色法是一种旨在通过螯和技术，使钙离子和茜素红S产生复合物，来分析固定处理的细胞样本中橘红色钙沉积现象的权威而经典的技术方法。主要适用于动物原生代或培养细胞的钙沉积和钙化结节检测。广泛用于骨细胞或组织病理生理的研究。

二、实验步骤：

1.去除培养基，1×PBS（pH7.2，不含钙镁）洗涤细胞爬片 2 次；

2.70%乙醇室温固定细胞 60min；

3.去除固定液，1×PBS（pH7.2，不含钙镁）洗涤细胞爬片 2 次；

4.以茜素红染色液覆盖样本，37℃避光孵育60 分钟；

5.取出染色玻片，1×PBS，pH7.2，不含钙镁洗涤 5 次，每次 2min；

6.直接显微镜拍照观察。

三、结果判读：

钙结节呈红色或者橘红色，背景为浅红色。

四、注意事项：

1.试剂溶液在样品表面时，避免有气泡存在，同时确保铺满样品表面。

2.茜素红S染色时间根据钙盐的含量来确定。可在显微镜下面观察，见钙盐成较深的橘红色即取出洗涤，如染色液时间过长，可能出现弥散现象。