病理染色实验——AB-PAS染色
实验介绍
AB-PAS染色,石蜡切片技术里常用的检测肠、胃中酸性和中性粘液物质的染色方法。组织中的糖原、中性粘液物质呈红色,酸性粘液物质呈蓝色,混合性粘液物质呈蓝紫色或紫蓝色。主要用于区分中性和酸性粘液,及二者的比率。有些癌细胞可以通过此染色方法进行区分属于什么性质的癌。
实验步骤
(1)切片和烤片 :包埋好的蜡块使用徕卡病理切片机进行切片,切好的组织片放入40℃的水浴锅中进行摊片,防脱玻片倾斜着插入水面去捞取切片,使切片贴附在载玻片的合适位置,于60℃ 烤箱烤片3个小时即可。
(2)切片脱蜡:将石蜡切片依次放入二甲苯Ⅰ(10min)-二甲苯Ⅱ(10min)-无水乙醇Ⅰ(5min)-无水乙醇Ⅱ(5min)-95%酒精(3min)-90%酒精(3min)-80%酒精(2min)-70%酒精(2min),然后蒸馏水浸洗2min。
(3)阿利新蓝染色:切片入阿利新蓝染液中染色5min,自来水洗2min;
(4)高碘酸染色:切片入高碘酸染液中15min,自来水洗,蒸馏水洗两遍;
(5)雪弗染色:切片入雪弗染液避光染色30min,流水冲洗5min;
(6)苏木素染色:切片入苏木素染液染3-5min,自来水洗,分化液分化,自来水洗,返蓝液返蓝,流水冲洗。
(7)脱水封片:切片依次入无水乙醇I 5min -无水乙醇II 5min-无水乙醇Ⅲ5min -二甲苯Ⅰ5min -二甲苯Ⅱ5min透明,中性树胶封片,显微镜镜检,图像采集分析。
实验案例
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