尼氏染色

病理染色实验——尼氏染色

实验介绍

尼氏体分布于神经细胞质内的三角形或椭圆形小块状物质，能被碱性染料如硫堇、亚甲蓝、甲苯胺蓝等染料染成紫蓝色。各种神经细胞内都含有尼氏体，但其形状、数量、分布位置常常不通过。通常科研实验中尼氏染色液（甲苯胺蓝法）采用甲苯胺蓝为核心燃料，可以用于石蜡组织切片的尼氏体染色，用于判断神经细胞是否受损。

实验步骤

（1）切片和烤片 ：包埋好的蜡块使用徕卡病理切片机进行切片，切好的组织片放入40℃的水浴锅中进行摊片，防脱玻片倾斜着插入水面去捞取切片，使切片贴附在载玻片的合适位置，于60℃ 烤箱烤片3个小时即可。

（2）切片脱蜡：将石蜡切片依次放入二甲苯Ⅰ（10min）-二甲苯Ⅱ（10min）-无水乙醇Ⅰ（5min）-无水乙醇Ⅱ（5min）-95%酒精（3min）-90%酒精（3min）-80%酒精（2min）-70%酒精（2min），然后蒸馏水浸洗2min。

（3）切片入预热60℃ 1%的甲苯胺蓝染液染色40min，蒸馏水洗3次。

（4）95%酒精快速分化，脱色，显微镜镜检至背景清晰为止。

（5）无水乙醇快速脱水，二甲苯透明，通风柜中风干后中性树胶封片。

实验案例