HE染色

病理染色实验——HE染色

实验介绍

苏木素-伊红染色法检测HE染色，是普通光学显微镜观察和鉴别细胞凋亡和坏死的一种染色方法，石蜡切片技术理常用的染色方法之一。苏木素染液为碱性，主要使细胞核内的染色质与胞质内的核糖体着紫蓝色；伊红为酸性燃料，主要是细胞质核细胞外基质中的成分为红色。由于不同组织不同细胞的成分不同，染色结果颜色深浅不一；HE染色是组织学、胚胎学、病理学科研中最基本、使用最广泛的技术；

实验步骤：

（1）组织脱水

（2）组织透明：组织块经酒精脱水后必须经过透明。透明剂能同时与脱水剂和石蜡混合，它取代了脱水剂后，石蜡便能顺利地渗入组织。

（3）浸蜡：透明后的组织块依次经3缸石蜡（60℃）进行浸蜡。

（4）包埋：包埋是使浸透蜡的组织块包裹在石蜡块中。包埋用蜡的温度应略高于浸蜡温度，保证组织块与包埋石蜡完全融为一体。

（5）切片和烤片 ：包埋好的蜡块使用徕卡病理切片机进行切片，切好的组织片放入40℃的水浴锅中进行摊片，防脱玻片倾斜着插入水面去捞取切片，使切片贴附在载玻片的合适位置，于60℃ 烤箱烤片3个小时即可。

（6）切片脱蜡：将石蜡切片依次放入二甲苯Ⅰ（10min）-二甲苯Ⅱ（10min）-无水乙醇Ⅰ（5min）-无水乙醇Ⅱ（5min）-95%酒精（3min）-90%酒精（3min）-80%酒精（2min）-70%酒精（2min），然后蒸馏水浸洗2min。

（7）切片入Mayer氏苏木素染液染色5-7min，自来水洗浸洗返蓝。

（8）切片入1%水溶性伊红染液染色5min，自来水洗浸洗30s。

（9）无水乙醇I：5min ；无水乙醇Ⅱ：5min；二甲苯I：5min；二甲苯Ⅱ：5min

（10）风干后中性树胶封片，最后镜检。

实验案例