昆虫细胞蛋白表达简介

hjg
分子实验 昆虫细胞蛋白表达简介评论87阅读模式

杆状病毒表达载体系统（baculovirus expression vector system，BEVS）是当今基因工程四大表达系统之一。BEVS属于真核表达系统，通过BEVS得到的重组病毒易于筛选、具有翻译后修饰功能、表达外源基因的效率较高。BEVS还可以同时表达多个外源基因，在分泌蛋白生物活性的同时增加产量。因此，BEVS在科研和工业生产中通常应用于大规模重组蛋白的制备。

实验流程及内容
1.密码子优化及基因合成：
分析基因序列，优化密码子，合成目的基因，提供载体。
2.重组质粒构建：
构建含有目的基因的载体质粒。
3.重组杆状病毒载体构建：
将目的基因亚克隆到合适的杆状病毒转移载体上。
4.重组杆状病毒扩大培养：
转染昆虫细胞，制备病毒贮液，空斑实验测定病毒滴度。
5.表达条件优化：
检测并优化表达条件（细胞株、MOI、时间温度等）。
6.大规模杆状病毒昆虫细胞培养：
根据优化条件，可提供大规模细胞培养。
7.蛋白分析和纯化：
1）通过SDS-PAGE电泳检测每步结果并控制最终产品质量。
2）通过Western-blot验证目标蛋白正确性。
3）通过亲和层析，离子交换，疏水及凝胶过滤等方法纯化表达的重组蛋白。
4）去除不需要的纯化标签。

昆虫细胞蛋白表达简介

北京科沿有道生物科技有限公司，专注于生命科学最前沿科研技术服务，具有较好的生物学和医学技术服务平台，能够提供实验课题设计、论文编辑润色，以及细胞实验、动物模型、病理检测、分子实验、免疫检测、病毒包装、组学服务、基因编辑等整体课题一站式服务。

科沿有道秉承“客户为先，服务至上”的经营理念，以一切为了客户的利益为宗旨，努力为广大客户提供最优质、高效的服务，科沿有道人用实实在在的优质实验技术换取客户的信任，相信在未来的工作中，科沿有道人一定能够成为您的得力助手和值得信赖的合作伙伴。

北京科沿有道生物科技有限公司，专注于生命科学最前沿科研技术服务，具有较好的生物学和医学技术服务平台，能够提供实验课题设计、论文编辑润色，以及细胞实验、动物模型、病理检测、分子实验、免疫检测、病毒包装、组学服务、基因编辑等整体课题一站式服务。
科沿有道秉承“客户为先，服务至上”的经营理念，以一切为了客户的利益为宗旨，努力为广大客户提供最优质、高效的服务，科沿有道人用实实在在的优质实验技术换取客户的信任，相信在未来的工作中，科沿有道人一定能够成为您的得力助手和值得信赖的合作伙伴。
weinxin
我的微信
我的微信
微信扫一扫
 
hjg
  • 本文由 hjg 发表于 2024年8月21日 14:13:38
  • 转载请务必保留本文链接：https://www.kyyd-bio.cn/1585.html
匿名

发表评论

匿名网友

:?: :razz: :sad: :evil: :!: :smile: :oops: :grin: :eek: :shock: :???: :cool: :lol: :mad: :twisted: :roll: :wink: :idea: :arrow: :neutral: :cry: :mrgreen:

确定