一、包涵体的纯化和复性概述 包涵体折叠复性的方法应具备以下几个特点:较高的活性蛋白质回收率;复性产物易于与错误折叠蛋白质分离;折叠复性后能够得到较高浓度的蛋白;折叠复性方法易于放大等。蛋白复性的过程通...
细菌突变体文库构建
一、背景介绍转座子(transposon)是一类可以自主位移并插入宿主基因组中随机位点的移动遗传因子,这种转位特性使它可以直接或间接地造成基因重排,引起基因变异。随着许多微生物基因组全序列的获得,人们...
密码子、mRNA结构及基因表达优化
密码子优化是基因表达优化的关键步骤之一。其中涉及mRNA二级结构、稀有密码子、核糖体结合位点等关键因素。简单说,基因能否顺利表达蛋白与稀有密码子含量、mRNA结构是否阻碍翻译有很大关系。基因表达优化还...
蛋白质质谱鉴定简介
一、技术简介:蛋白质(Protein),作为生命的物质基础,是生物体中含量高,功能重要的生物大分子,存在于所有生物细胞,是生命活动的主要承担者。蛋白质在催化生命体内各种反应进行、调节代谢、抵御外来物质...
CRISPR-Cas9文库筛选技术简介
基于CRISPR的工具彻底改变了靶向与疾病相关的基因突变的能力,如今,CRISPR的工具箱一年比一年更加扩大,作为CRISPR技术的先驱,张锋教授团队在《Science》发表了一篇题为“A cytos...
非编码RNA实验简介
非编码RNA(Non-coding RNA)是指不编码蛋白质的RNA。其中包括rRNA、tRNA、snRNA、snoRNA、microRNA和lncRNA等多种已知功能的RNA,还包括未知功能的RNA...
蛋白胶点胶条鉴定
蛋白胶点、胶条鉴定是目前使用最广泛的蛋白质组学研究手段,用双向电泳(Two-dimensional gel electrophoresis,2-DE)和聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE,Sodiu...
分子互作之核酸与蛋白互作
蛋白与核酸的相互作用广泛存在于生命活动的调节中。基因的复制、转录、翻译、修饰等过程都离不开核酸和蛋白的互作。科沿有道提供RNA pull down+质谱、双荧光素酶、染色质免疫共沉淀、凝胶迁移或电泳迁...
分子互作之核酸与核酸互作
miRNA可以与mRNA结合调节体内基因的表达,通过影响蛋白的表达、修饰、酶活性等来调节生命活动的进行。lncRNA作为体内的ceRNA,可以与miRNA结合起到调节基因表达的作用。研究lncRNA与...
RIP常见问题与解答
一、什么是RIP?RIP技术(RNA Binding Protein Immunoprecipitation Assay,RNA 结合蛋白免疫沉淀)主要是运用针对目标蛋白的抗体把相应的RNA-蛋白复合...
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