甲苯胺蓝染色简介

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一、技术简介:

甲苯胺蓝是常用的人工合成染料的一种,属于醌亚胺染料类,这类染料一般含有两个发色团,一个是胺基,一个是醌型苯环,来构成色原显色。染料除有发色团外,还要有能使色原对组织及其他被染物产生亲和力的原子团即助色。助色团能促使染料产生电离成盐类,帮助发色团对组织产生染色力,使切片上的组织细胞着色。甲苯胺蓝不仅含有两个发色团,还含有两个助色团,为碱性染料,甲苯胺蓝中的阳离子有染色作用,组织细胞的酸性物质与其中的阳离子相结合而被染色。

二、实验步骤:

1、脱蜡

(1)70℃烤片5min;

(2)二甲苯(I)中脱蜡10 min;

(3)二甲苯(II)中脱蜡10 min;

(4)100%乙醇(I)中5 min洗去二甲苯;

(5) 100%乙醇(II)中5 min洗去二甲苯;

2、水化

(1)95%乙醇中水化1 min;

(2)85%乙醇中水化1 min;

(3)75%乙醇中水化1 min;

(4)蒸馏水中水化待用;

3、染色

(1)甲苯胺蓝染色液染色30min;

(2)流水冲洗2 min;

(3)1%盐酸酒精分化至软骨细胞呈紫蓝色清楚可见;

(4)流水冲洗切片5 min;

(5)蒸馏水过洗1-2 s;

 4、脱水

(1)85%乙醇脱水1 min;

(2)95%乙醇脱水1min;

(3)无水乙醇脱水1min;

(4)无水乙醇脱水1min;

 5、透明

(1)二甲苯(I)透明2 min;

(2)二甲苯(II)再次透明2min;

6、封片、镜检

在石蜡切片的中央滴加一滴中性树胶,盖上盖玻片封固,显微镜下观察拍照。

三、结果判读:

肥大细胞、尼氏体呈蓝色。

甲苯胺蓝染色简介

四、注意事项:

1、注意软骨和背景的分化程度;
2、注意甲苯胺蓝染液的效价,及时更换染液。
甲苯胺蓝染色简介

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  • 本文由 hjg 发表于 2023年9月5日 15:37:49
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